南京市鼓樓幼兒園前身是鼓樓幼稚園，即國立東南大學教育科實驗幼稚園，由南京高等師範學校和國立東南大學（後改為國立中央大學、南京大學）教育科（教育科即今南京師範大學）教授陳鶴琴在陶行知、徐養秋等人支持下於民國12年（1923年）創辦。鼓幼在中國幼兒教育史上具有特殊的意義，是中國現代幼兒教育的誕生地，也是中國歷史上第一所開展現代教育科學研究的幼稚園。民國早年作為南京高師與東大實驗幼稚園的鼓樓幼稚園，和南高、東大附屬小學、附屬中學一起，構成了現代中國基礎教育科學化研究的實驗中心。1952年8月，鼓樓幼稚園改名為南京市鼓樓幼兒園。
